Bicuculline and picrotoxin block γ-aminobutryic acid-gated Cl− conductance by different mechanisms

Summary Using isolated, internally perfused bullfrog dorsal root ganglion cells we have studied the dose-response curves for -aminobutyric acid (GABA) in the presence of internally or externally applied GABA antagonists. With external application of antagonists the inhibition of the GABA current by bicuculline was competitive and that by picrotoxin was noncompetitive. Picrotoxin but not bicuculline blocked when internally perfused.To whom reprint requests should be addressed.Acknowledgments. We thank Drs S. Minakami and S. Yasui for helpful discussions and comments.     

P物质对GABAA受体介导电流的作用

应用全细胞膜片箝技术,在大鼠新鲜分离的背根神经节细胞上观察到:SP对GABA激活电流有调制作用。实验结果表明:多数受检的大鼠背根神经节神经元对SP(28/41,68.5％)和GABA(36/41,88.2％)敏感,100μmol/LSP和100μmol/L GABA激活内向电流的幅值分别为243.8±82.7pA(x±s,n=9)和1.76±0.48nA(x±s,n=13)。GABA与SP激活的内向电流明显不同,前者具有明显的去敏感现象。实验预加SP(0.001～1μmol/L)30s后再加GABA,则GABA激活电流的幅值明显减小,而且GABA激活电流减小的程度与预加SP的浓度呈量效依赖关系。SP主要抑制GABA激活电流的峰电流,对其稳态电流的抑制不明显。预加0.1μmol/L SP之后约4min左右,SP对GA-BA激活电流的抑制效率最大,为49.8±7.2％(x±s,n=7,P≤0.01),而预加SP 12min之后,SP才失去对GABA激活电流的抑制作用。     

优化提取与分离海兔大脑神经节蛋白质组

蓝斑背肛海兔（Notarcus Leachii cirrosus Stimpson，NLCS）属于海洋软体动物．NLCS大脑神经节（cerebral ganglion，CG）富含高丰度的脂类物质，并干扰了三氯醋酸-丙酮法沉淀CG蛋白质．本实验的目的是找到一种适合提取、分离海兔CG蛋白的方法．经各种实验方法对比后，发现超速离心法能有效分离CG破碎液中的脂类化合物，提高双向凝胶电泳法分离BG蛋白质组的分辨率，大约可检测到450个蛋白质点．     

血竭总黄酮对小鼠三叉神经节细胞河豚毒素敏感型钠通道电流的抑制作用

目的:观察血竭总黄酮对小鼠三叉神经节(TG)细胞河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道电流的影响,确定血竭对TG细胞电压门控性钠通道电流产生抑制效应的有效部位.方法:酶解法急性分离昆明种小鼠(1月龄)三叉神经节细胞,应用全细胞膜片钳技术记录TG 细胞TTX-S钠通道电流,观察血竭总黄酮对其影响.结果:在钳制电位为-90 mV时,3种浓度(0.001 %,0.01 %,0.1 %)的血竭总黄酮对锋钠电流的抑制率分别为17.02±5.42 %,33.23±5.12 %,49.30±5.14 %(P值均小于0.05),抑制效应呈典型的浓度依赖性,血竭总黄酮对TG细胞TTX-S锋钠电流的半数抑制浓度(IC50)为0.101 3 %.结论:血竭总黄酮是血竭抑制TG细胞TTX-S钠通道电流的有效部位,该研究为血竭有效成分的提取缩小了研究范围.     

副交感神经节细胞5─羟色胺去极化反应的离子基础

使用离体细胞内记录，研究了猫副交感性胰腺神经节细胞的５－羟色胺（５－ＨＴ）去极化反应及其离子基础。５－ＨＴ使大部份细胞（４７／５１）产生去极化反应。反应只有两种类型：快去极化（６／４７）及慢去极化（３５／４７），另有６个细胞出现先快、后慢的双相去极化反应；５－ＨＴ导致的快去极化伴有膜电阻减小，向细胞内通以超极化直流电形成条件性膜超极时其幅度增大，提示Ｎａ＋导增大是其离子基础；５－ＨＴ导致的不同细胞的慢去极化分别伴随膜电阻增大、减小或不变，条件性膜超极时其幅度分别增大或不变，提示不是单一离子、而是多种离子参与其形成。分别用低Ｎａ＋、高Ｋ＋溶液灌注神经节，５－ＨＴ慢去极化均明显减小，而低Ｃｌ－溶液则无明显效应，表明Ｎａ＋导增大和／或Ｋ＋导减少是５－ＨＴ慢去极化的离子基础。     

脊髓背根神经节切除模型——周围神经趋化性再生定量研究模型的建立

为了建立脊髓背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）切除模型，选择性地使感觉神经纤维溃变而保持运动神经纤维的正常功能，从而为周围神经趋化性再生的定量评价提供有效的研究方法。将雄性SD大鼠20只，随机分为两组，每组10只动物。大体解剖组：解剖大鼠坐骨神经的神经根组成及DRG的位置。DRG切除组：切除支配大鼠坐骨神经的每个神经根的DRG。观察大鼠DRG切除后步态变化及足部溃疡情况。切除后3周，取双侧坐骨神经、胫神经、腓神经及腓肠神经行髓鞘染色，观察各神经中感觉神经纤维溃变情况；行美兰复红染色，计算机图像分析，运动神经纤维计数。发现大鼠坐骨神经由L4、L5、L6神经干组成，DRG位于腹、背侧根汇合处近心端1mm处。DRG切除术后，大鼠步态失去协调性，但展趾宽度无明显改变。DRG切除后3周，髓鞘染色显示腓肠神经中有髓神经纤维髓鞘完全溃变，坐骨神经、胫神经、腓神经中部分有髓神经纤维发生溃变。美兰复红染色、计算机图像分析计数显示坐骨神经及三个主要分支内，有髓运动神经纤维分别占其总数的58．4％、54．6％、45．4％、0。说明DRG切除模型，可以有效区分感觉和运动神经纤维，能够较好地定量评价周围神经趋化性再生的效果。通过比较不同桥接材料和不同修复方法的错接率，从而定量评价各修复材料和方法的趋化性再生效果。     

Depolarization Induced by Substance P on Rat Stellate Ganglion Neurons

应用细胞内生物电记录技术，观察神经肽Ｐ物质（ＳＰ）对大鼠星状神经节细胞的影响。ＳＰ在１μｍｏｌ～１０μｍｏｌ或更高的浓度范围内，供试３５个细胞，有２８个细胞发生膜除极反应。用低钙（０．２５ｍｍ）或用含河豚毒素（ＴＴＸ，１μｍｏｌ）克氏液灌流神经节，不影响ＳＰ引起的除极反应的幅度和时程。ＳＰ引起除极反应的同时常伴有膜电阻增大。当膜电位增大时，除极化反应幅度变小，反转电位为－８０ｍＶ至－１００ｍＶ。研究表明，ＳＰ对部分星状神经节细胞具有兴奋作用，使通过这些细胞的信息传递增强；ＳＰ对细胞膜的除极作用是由于其引起细胞膜钾导降低所致。     

三叉神经慢性缩窄环术大鼠半月节射频热凝的实验研究

目的观察三叉神经慢性缩窄环术大鼠半月节射频热凝的大体及镜下改变，探讨射频热凝温度和时间与半月神经节损伤的关系。方法36只成年雄性SD大鼠，随机选取33只建立慢性缩窄性损伤三叉神经痛模型。建模成功2周后，随机分为3组：射频热凝组（R组，n=24），假手术纽（S组，n=6），热凝对照纽（C组，n=3）。经中颅窝开颅暴露半月神经节，R组行半月节穿刺热凝，根据温度、时间随机分为8个小组，每组3只，分别为：65℃120″、180″组，70℃120″、180″组，75℃120″、180″组，80℃120″、180″组。S组仅行半月节穿刺不热凝，按留针时间分为120″、180″两组；C组不行半月神经节穿刺及热凝。余3只SD大鼠作为正常对照组（N组）。R组及S组热凝或穿刺结束即取出大鼠半月神经节，C组、N组直接取出半月神经节，观察半月神经节大体变化，游标卡尺测量神经节毁损区直径，光镜下观察神经节细胞的变化。结果S组、C组与N组比较，大鼠半月神经节大体及光镜下均无明显变化。R组在65℃时大鼠半月节大体及镜下无明显损伤；70℃时开始在肉眼及镜下出现损伤；75℃、80℃时半月节则出现明显凝固区，毁损区直径测量较70℃组明显增大（P〈0．01），光镜下神经元细胞核出现不同程度的固缩改变。毁损温度越高、时间越长，损伤范围越大，程度越重。结论75℃、80℃射频热凝可导致神经节细胞明显变性，损伤程度及范围随温度升高、时间延长逐渐加重与增大。     

人胎颈交感节肽能神经元的免疫细胞化学的研究

取１６例２４～３２周龄的死亡人胎作材料，用免疫细胞化学方法，于光镜下观察到颈上神经节（简称颈上节）和星状神经节（简称星状节）中存在含血管活性肠肽（ＶＩＰ）神经元和纤维，含生长抑素（ＳＯＭ）神经元和纤雏以及含Ｐ物质（ＳＰ）纤维，但未发现含ＳＰ神经元。二节中的含ＶＩＰ神经元和含ＳＯＭ神经元形状多种，免疫反应染色深浅不等，颈上节以大、中型细胞为主，而星状节以中、小型细胞居多。上述神经元类型和分布未有明显的胎龄变化。结果揭示颈交感神经节中，含ＶＩＰ和含ＳＯＭ神经元在出生前已经发育。ＶＩＰ、ＳＯＭ和ＳＰ３种神经肽在胎儿期已作为神经传导物或神经调节物而发挥功能。